產(chǎn)品名稱：小鼠單克隆抗體Ig類、亞類、亞型鑒定試劑盒
規(guī)格：2X96孔（ 可測(cè)22個(gè)樣品）
注：如果只需要測(cè)重鏈類或者亞類，不需要測(cè)輕鏈亞型。請(qǐng)選擇QY282檢測(cè)試劑盒！
產(chǎn)品說(shuō)明如下：
一、試劑原理：本試劑盒利用雙抗體夾心法鑒定小鼠淋巴細(xì)胞雜交瘤培養(yǎng)上清中單克隆抗體或特異親和純化的單克隆抗體的類和亞類以及輕鏈亞型（可區(qū)分出IgG1\IgG2a\IgG2b\IgG3\IgM\IgA\Kappa\Lambda）。采用小鼠抗體共有位點(diǎn)的二抗包被微孔板，與加入的培養(yǎng)上清中的小鼠抗體結(jié)合，再加入HRP標(biāo)記的抗小鼠各類、亞類、亞型的抗體來(lái)分別反應(yīng)，最后用TMB底物系統(tǒng)顯色并用稀硫酸終止，再通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度來(lái)判斷被測(cè)單克隆抗體的類或亞類以及亞型。本試劑盒具有極高的分辨率，是您鑒定小鼠單克隆抗體類、亞類以及亞型的可靠工具。
二、組成成分：
酶標(biāo)板 含自封袋2個(gè) | 2ⅹ96孔 | 標(biāo)本稀釋液 | 15ml |
通用陽(yáng)性對(duì)照 | 1.5ml | 顯色劑A | 15ml |
通用陰性對(duì)照 | 1.5ml | 顯色劑B | 15ml |
酶標(biāo)二抗 8種 | 8×3.2ml | 反應(yīng)終止液 | 15ml |
| 20×清洗液 | 60mL | 加樣圖 | 2份 |
| 封板膜 | 4張 | 說(shuō)明書 | 1份 |
三、使用范圍：用于雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清中小鼠單克隆抗體Ig類、亞類的鑒定以及相關(guān)內(nèi)容的研究。
四、使用方法：
1、首先將試劑盒恢復(fù)室溫（大約30分），然后用純水把清洗液配成工作濃度（一份濃縮清洗液加19份純水）。
2、取出酶標(biāo)板。每個(gè)標(biāo)本需要8孔，陽(yáng)性對(duì)照8孔，陰性對(duì)照8孔。多余的用自封袋保存，記得放入干燥劑。
3、將細(xì)胞培養(yǎng)上清（或特異親和純化的抗體）50μl加入酶標(biāo)微孔板，每個(gè)標(biāo)本加8孔，陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照也是各加8孔每孔50μl。然后每孔再加入50μl標(biāo)本稀釋液。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。
4、棄去板內(nèi)液體，洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干或機(jī)洗5遍。再在每個(gè)標(biāo)本的8孔中分別加入8種酶標(biāo)二抗各100μl，通用陽(yáng)性對(duì)照的8孔也一樣。在加樣圖上或酶標(biāo)板上做好標(biāo)記。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。
5、吸棄板內(nèi)液體，洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干或機(jī)洗5遍。每孔分別加入顯色劑A和顯色劑B各50μl，換一張新的封板膜貼板避光37℃顯色20分鐘。
6、本試劑盒特異性好一般肉眼即可觀察出結(jié)果，看顯色藍(lán)的那個(gè)孔所對(duì)應(yīng)的酶標(biāo)二抗就知道此標(biāo)本的Ig類或亞類。更可將反應(yīng)終止液（每孔50μl）終止反應(yīng)后用酶標(biāo)儀450nm測(cè)定波長(zhǎng)，630nm參考波長(zhǎng)雙波長(zhǎng)測(cè)定結(jié)果，參看高值孔所對(duì)應(yīng)的酶標(biāo)二抗就知道此標(biāo)本的Ig類或亞類(陽(yáng)性對(duì)照OD一般不小于0.8，陰性對(duì)照一般不高于0.12，陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)：樣品OD大于陰性O(shè)D+0.15，陰性O(shè)D低于0.05按0.05算)。
五、產(chǎn)品特點(diǎn)：高靈敏度、高特異性、結(jié)果容易判定。（您如果覺(jué)得很多試劑自己可以準(zhǔn)備想省一筆費(fèi)用，那您可以登陸網(wǎng)站選擇我們?yōu)槟鷾?zhǔn)備的簡(jiǎn)裝抗體鑒定產(chǎn)品QY283。當(dāng)然您也可以下次把標(biāo)本交給我們來(lái)做這樣并且不會(huì)增加太多費(fèi)用。）
六、保存條件：不開啟2-8℃避光保存效期一年。不正確存放或過(guò)于頻繁開啟使用有可能因此使效期縮短。
七、注意事項(xiàng)：
1、雖然本試劑盒過(guò)期后很久還有使用價(jià)值但還是請(qǐng)您在有效期內(nèi)使用。
2、在檢測(cè)腹水類單抗時(shí)要稀釋到1/5萬(wàn)，雖然可以分辨但并不建議您這樣做。此類樣品成分十分復(fù)雜，有干擾結(jié)果的可能。在此種情況下您可以選擇本公司的QY283抗體鑒定試劑。它會(huì)給您帶來(lái)滿意的結(jié)果。您也可以將酶標(biāo)板更換成您自己的抗原包被板那樣也是可以用來(lái)測(cè)試腹水、以至于幾乎任意一種形式的單抗樣本的檢測(cè)，結(jié)果同樣跟上清一樣滿意！ 3、手洗板子時(shí)一定要把孔加滿，停留10秒然后棄盡，最后要拍干凈。特別是在酶標(biāo)二抗溫育后洗板時(shí)一定要把酶吸出而不是甩出，要吸凈。這個(gè)在手工洗板時(shí)對(duì)結(jié)果很重要。
4、一次沒(méi)用完的板子要帶干燥劑放自封袋封好，隨盒存放。
5、拿放板子時(shí)不要?jiǎng)×叶秳?dòng)，以免孔間交叉污染出現(xiàn)錯(cuò)誤結(jié)果。
6、本試劑一般不會(huì)出現(xiàn)兩個(gè)陽(yáng)性，但出現(xiàn)兩個(gè)陽(yáng)性的現(xiàn)象有時(shí)候是真實(shí)存在的，一般會(huì)一個(gè)OD很高,另一個(gè)很低但卻還能判為陽(yáng)性，實(shí)驗(yàn)分析表明這種情況下以O(shè)D高值孔為準(zhǔn)，出現(xiàn)這種情況有多重原因：1、培養(yǎng)的細(xì)胞中有“飼養(yǎng)細(xì)胞”殘留，2、抗體本身存在變異，3、融合的淋巴細(xì)胞取自不純的BALB/C，4、樣品為非特異親和純化的抗體或樣品是腹水，5、上清出現(xiàn)少量污染，6、實(shí)驗(yàn)操作粗放，7、加錯(cuò)試劑。
7、陽(yáng)性對(duì)照數(shù)據(jù)并不完全一樣，僅作為有效指示。
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